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拟南芥培養箱普通的培養和特殊培養方法
點擊次數:1082 發布時間:2016-04-11
    
    拟南芥又名阿拉伯芥,屬十字花科,為二年生草本植物。具有植株形态小,平鋪直徑5cm,高30cm;生長區域小,易于培養;基因組小,隻有5條染色體,15700萬個堿基對,27000個基因;生長速度快,周期短,一個世代大約隻需要6周的時間;可自花授粉,也可以在不同種質系間雜交,種子多,每株每世代可産數千粒種子等特點。因此,拟南芥是植物科學,包括遺傳學和植物發育研究中的模式植物之一。在2000年,拟南芥成為了*個基因組被完整測序的植物。
    拟南芥培養箱簡單的培養,可用于基因表達、器官發育、基因突變等研究。
    1、首先把拟南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進行消毒處理,再用無水酒精進行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無菌水沖洗5遍,然後将種子點到MS培養基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
    2、把種子放到4℃黑暗條件下進行春化48h-72h左右,在長日照或短日照條件下催芽,。利用PLC控制器,編輯簡單的晝夜模式,設定光照時間16小時(黑暗8小時)或者光照14小時(黑暗10小時);選配Q23+連續光強調節裝置,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室内溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統,設定室内相對濕度70%。
    3、出苗大約7~10天,然後移入土中培養,采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在*次澆水前,可使土壤完全幹燥,以後每隔7~10天澆一次水。
    4、土壤可用營養土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進行混合。在生長過程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
    5、當植株長到一定高度時,可剪斷莖杆,以産生更多的花序,可用于轉化研究或者獲得更多的種子。
    拟南芥培養箱特殊培養
    為了加快拟南芥生長速度,在移入土壤培養後,可設定長日照,利用PLC控制器,編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續22-23℃。
    拟南芥根系處理培養,可減少光照時間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其餘培養條件同正常培養。